Formatos disponibles:
- Mob262
- PDM106
- PDM106-10MM
Inmunógeno: Células formadoras de la roseta E purificadas de los linfocitos de la sangre periférica humana. Clon: H036-1.1.1 Especie: Ratón Isotipo: IgM, Kappa Diluyente Primario de anticuerpos: K004
Catálogo:
- Mob262: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos
- PDM106: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos
- PDM106-10MM: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue™ Sistema de detección automática y Montage™ Sistema 360
Uso previsto: Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.
Resumen y explicación: Reconoce una glicoproteína de saldo de 27-32kDa, identificada como CD99, o MIC2 producto del gen, o antígeno E2. El gen MIC2 está localizado en la región pseudo-autosomal del cromosoma X y el humano. El gen MIC2 codifica dos proteínas distintas, que se producen por empalme alternativo del transcrito del gen CD99 y CD99r con bandas de 30 y 32kDa (p30/32). Aunque el 60% de su secuencia del fondo, CD99 está implicado en varios procesos celulares, entre ellos, la agregación homotípica de células, la adhesión y la regulación de las moléculas de los receptores de células T y HNS, la apoptosis de los timocitos inmaduros y las diapédesis leucocitaria. El CD99 se expresa en la membrana de varias células, aunque el índice de expresión varía entre tejidos y durante la edad. La mayoría de las células de los islotes pancreáticos se expresan fuertemente en las células de Müller del epitelio de la vesícula seminal de conejo. Los granulocitos maduros expresan muy poco o nada de CD99. MIC2 se expresa fuertemente en la célula del sarcoma de Ewing y primitivas tumorales neuroectodérmicas periféricas. Este MAb muestra una muy similar reactividad a otros CD99 MAbs (por ejemplo, 013, 12E7, o HBA-71) y es excelente para la tinción inmunohistoquímica de la formalina fija, incorporada en la parafina.
Formato: Este producto se suministra como una inmunoglobulina purificada y contiene azida sódica como conservante.
Principios de los procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.
Dilución del anticuerpo primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.
Materiales necesarios, pero no suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles con Diagnostic BioSystems.
Almacenamiento y manipulación: Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día.
Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0,1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0,1% no son materiales peligrosos notificados según US 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. El azida de sodio (NaN3) usado como un conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar ácidos metálicos altamente explosivas. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías.
Recogida y preparación de muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981: Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.
Características de presentación: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.
Procedimiento de tinción: Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de Detección de Montage PolyVue™ Auto para obtener orientación sobre los protocolos de tinción específicos u otros requisitos.
- Parámetro:
- Control positivo: Ewing’s sarcoma
- Dilución del concentrado: 1:50 – 1:100
- El pretratamiento: EDTA Buffer pH 8,0
- Tiempo de incubación y temperatura: 30 min @ RT
- Sistema de Detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360
- Tipo de tejido: FFPE
Control de calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.
Localización celular: Membrana Celular
Limitaciones del procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones
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