CD8, T Cell Anticuerpo monoclonal de ratón

Inmunógeno: Un péptido de 13 aminoácidos del dominio citoplasmático C-terminal de la cadena alfa de la molécula CD8 humana.
Clon: 144B
Especie: Ratón
Isotipo: IgG1, Kappa
Diluyente Primario de Anticuerpos: K004

La concentración del lote específica está disponible a petición.

Catálogo # | Descripción

• Mob117: Anticuerpo concentrado para uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
• PDM094: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
• PDM094-10MM: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de detección automática y Montage™ Sistema 360.

Uso previsto
Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Los historiales clínicos de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una persona(s) cualificada(s) al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y explicación
El CD8 es un receptor de la superficie celular expresado ya sea como un homodímero con la cadena CD8 α (CD8 α/α) o como un homodímero (CD8 α/β). La mayoría de los timocitos y un subconjunto de células T y NK maduras expresan CD8α. Es un marcador útil para distinguir los linfomas de células T maduras. La mayoría de los linfomas periféricos de células T son CD4+/CD8-. El análisis de células fijadas en linfomas sugiere que CD4+ y CD8+, y en el linfoma/leucemia linfoblástica T, los CD4 y los CD8 suelen ser co-expresados. CD8 también se encuentra en el anillo de células intersticiales del timo.

Formato
Este producto se suministra como una inmunoglobulina purificada y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los procedimientos
La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del anticuerpo primario
Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio. Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems, deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción, cuando se utilizan con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquier método de detección distinto a los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse apropiadamente y verificarse de acuerdo con el sistema de detección utilizado.

Materiales necesarios, pero no suministrados
Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com

Almacenamiento y manipulación
Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de la preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día. La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se deteriora y no debe utilizarse.

Los controles positivos y negativos deben ejecutarse simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por las variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.

Recogida y preparación de muestras
Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981: Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras.

Se recomienda al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido preparado y manipuladas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones
Este anticuerpo contiene menos del 0.1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0.1% no son materiales peligrosos notificables según U.S 29 CFR 1910.1200, OSHA Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. La azida de sodio (NaN3) usando como conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Las muestras, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con zonas sensibles, lavar con abundantes cantidades de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la tinción no específica. Los tiempos de incubación y temperaturas diferentes de las especificadas pueden dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.

El tratamiento de los tejidos antes de la tinción
Colocar los portaobjetos en la solución de recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de recuperación de antígeno de Diagnostic BioSystems, Montage Opus™. Permitir enfriar las laminillas durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de tinción
Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de detección de Montage PolyVue Plus™ Auto para obtener orientaciones sobre los protocolos de detección específicos u otros requisitos.

Parámetro | Recomendaciones Diagnostic BioSystems

• Control positivo: Amígdalas
• Dilución del concentrado: 1:50 – 1:100
• El pretratamiento: EDTA Buffer pH 8,0
• Tiempo de incubación y temperatura: 30 min a RT
• Sistema de Detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus o Sistema de Detección Automática PolyVue Plus™ para usar con el Sistema Montage 360
• Tipo de tejido: FFPE

Control de calidad
Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmunohistoquímica; Paute aprobada Segunda edición (E / ILA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Solución de problemas
Contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o su Distribuidor local para información de coloración inusual.

Localización celular
Membrana Celular

Limitaciones del procedimiento
La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histoquímicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de presentación
La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de la hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias

1. Mason DY, et al. Journal of Clinical Pathology, 19 92, 5(12):1084-8.
2. Korkosuz, P. et al. Immunophen otypic analysis of human spleen compartments. Ann Anat. 184: 431–441.
3. Krutok, J. L. et al. Splenic vascula r tumors. Semin. Diagnn. Pathol. 20: 128–139