CD10 (EP195) Anticuerpo monoclonal de conejo - Zebra Genetics Especialistas en Biotecnología y Equipos de Laboratorio.

CD10 (EP195) – Anticuerpo Monoclonal de Conejo, RMAB037, RMPD037. Esta hoja de datos es aplicable a todos los tamaños (volumen) del producto. El volumen real se indica en el vial o la botella. Documento: DS-0051-B. Fecha efectiva: 14/02/2018.

Inmunógeno: Un fragmento recombinante que corresponde a los residuos de la proteína CD10 humana. Clon: EP195. Especie: Conejo. Isotipo: IgG. Diluyente Primario de Anticuerpos: K004. La concentración de la especificidad del lote disponible a petición.

Catálogo: RMAB037. Descripción: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos. Catálogo: RMPD037. Descripción: Anticuerpo listo para usar, para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.

Uso Previsto: Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizados por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y Explicación: El antígeno común de la leucemia linfoblástica aguda (CALLA/CD10) es una metaloendopeptidasa transmembrana de tipo II de paso único que divide e inactiva una variedad de sustratos de encefalina y otros péptidos similares a la encefalina. Se expresa, incluyendo las encefalinas, la bombesina y la sustancia P. CD10 se expresa mediante un número de células hematopoyéticas como células T y B inmaduras, células B de los centros germinales de los folículos linfoides y granulocitos. También reacciona con una variedad de los tejidos no hematopoyéticos, incluidas las células epiteliales del tracto gastrointestinal y el riñón tubular. En el hígado, el canalículo biliar muestra una colocación moderada a fuerte. CD10 se ha utilizado para la identificación y clasificación de distintos tipos de linfoma maligno y leucemia. CD10 se expresa en un amplio porcentaje de los linfomas linfoblásticos agudos, linfoma folicular, linfoma de Burkitt, algunos tumores hematopoyéticos y leucemias mieloides en su crisis de explosión linfoide. También se sabe que es un marcador de las células linfoides de linfocitos B. Es útil para diferenciar el sarcoma endometrial (SEE) del leiomioma uterino (LUC) y del leiomiosarcoma uterino (LIU).

Formato: Este anticuerpo se purifica por afinidad y se diluye en una solución salina tamponada con fosfato (PBS) de 10 mM, con un pH de 7,5, que contiene 1% de albúmina sérica bovina (BSA) y un 0,05% de azida sódica (NaN3) como conservante.

Principios de los Procedimientos: La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de Tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del Anticuerpo Primario: Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción, cuando se utilizan con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquiera de los métodos de detección distintos a los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse apropiadamente y verificarse de acuerdo con el sistema de detección utilizado.

Materiales Necesarios, pero No Suministrados: Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares están disponibles en Diagnostic BioSystems. Para más información, por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.

Almacenamiento y Manipulación: Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas a las especificadas aquí, deben ser verificados para el uso. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día. La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se deteriora y no se debe utilizar.

Los controles positivos y negativos deben ejecutarse simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada que no puede explicarse por variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con el Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com.

Recogida y Preparación de Muestras: Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión en parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981: Sheehan & Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras. Se recomienda al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido propio y manejados de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones: Este anticuerpo contiene menos del 0.1% de azida sódica. Las concentraciones de menos del 0.1% no son materiales peligrosos notificados según US 29 CFR 1910.1200, OSHA de Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155 / CE. El azida de sodio (NaN3) usado como un conservante es tóxico si se ingiere. El azida de sodio puede reaccionar con tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas altamente explosivas. Tras la eliminación, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la acumulación de azida en las cañerías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Las muestras, antes y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellas, deben ser manejados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse en las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con áreas sensibles, lavar con grandes cantidades de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en tinción incorrecta. Tiempos de incubación o temperaturas diferentes a las especificadas pueden dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo solicitud.

El Tratamiento de los Tejidos Antes de la Tinción: Colocar los portaobjetos en la solución de recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de Recuperación de Antígenos Montage Opus™ de Diagnostic BioSystems. Permitir enfriar las láminillas durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de Tinción: Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus de Diagnostic BioSystems o el Sistema de Detección Automática PolyVue Plus™ para el Sistema Montage 360 para obtener orientación sobre protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

Parámetro: Control positivo. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: Amígdalas, carcinoma de células renales, linfoma folicular. Parámetro: Dilución del concentrado. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: 1:50 – 1:100. Parámetro: El pretratamiento. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: Citrato Buffer pH 6.0. Parámetro: Tiempo de incubación y temperatura. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: 30 min @ RT. Parámetro: Sistema de detección. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: Sistema de Detección de Dos Pasos PolyVue™ Plus o Sistema de Detección Automática PolyVue Plus™ para el Sistema Montage 360. Parámetro: Tipo de tejido. Recomendaciones Diagnostic BioSystems: FFPE.

Control de Calidad: Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de Ensayos de Inmunohistoquímica; Pauta Aprobada Segunda Edición (I/LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Solución de Problemas: Contacte al Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o a su distribuidor local para reportar tinción inusual.

Localización Celular: Citoplasma, membrana celular

Limitaciones del Procedimiento: La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica tanto métodos de detección histológicos como inmunológicos. El procesamiento y manejo de los tejidos antes de la inmunotinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y en la inclusión o la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad peroxidasa endógena o la actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción inespecífica dependiendo del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen el Antígeno de Superficie de la Hepatitis B (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). La contracoloración y el montaje inadecuados pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de Presentación: La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: fijación, método de recuperación de calor, tiempos de incubación, grosor de la sección de tejido y kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos de incubación y títulos listados no son aplicables a otros sistemas de detección y deben ser validados por el usuario. Las recomendaciones y protocolos de la hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos de Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden ser utilizados para la interpretación de hallazgos morfológicos en conjunto con otras pruebas de diagnóstico y datos clínicos pertinentes por un patólogo calificado.

Referencias: