Glypican-3 (GPC3)

Formatos Disponibles:

• Mob561: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos pasos.
• PDM561: Anticuerpo listo para usar con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Más – Sistema de Detección de dos pasos.

Detalles del Producto:

• Immunógeno: Péptido C-terminal de GPC3 (residuos: 511-560).
• Clon: YP7
• Especie: Ratón
• Isotipo: IgG1, Kappa
• Diluente Primario de Anticuerpos: K004

Uso Previsto:

Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejidos, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y Explicación:

El glicán-3 (GPC3) es una proteína de membrana anclada al glicofosfatidilinositol, que también puede encontrarse en forma secretada. El anti-GPC3 ha sido identificado como un marcador tumoral útil para el diagnóstico del carcinoma hepatocelular (HCC), el hepatoblastoma, el melanoma, los tumores de células germinales testiculares y el tumor de Wilms. En los pacientes con HCC, el GPC3 se sobreexpresa en el tejido hepático neoplásico y se eleva en el suero, pero es indetectable en el hígado normal, el tejido benigno y el suero de donantes sanos. La expresión del GPC3 también se encuentra más elevada en el tejido hepático del CHC que el tejido nodular o el hígado con lesiones focales como nódulos displásicos y áreas de adenoma hepático sin transformación maligna. En el contexto de los tumores de células germinales testiculares, la expresión del GPC3 está regulada en ciertos subtipos histológicos, específicamente en los tumores del saco vitelino y el coriocarcinoma. También se ha encontrado un nivel de expresión de GPC3 en algunos de los tumores embrionarios, como el tumor de Wilms y el hepatoblastoma, con una expresión baja o indetectable en tejido normal fetal o adulto. En los pacientes con cáncer de tiroides, la expresión del GPC3 aumenta dramáticamente en ciertos tipos de cánceres: 100% en el carcinoma folicular y 70% en el carcinoma papilar. La expresión del GPC3 en el carcinoma folicular es significativamente mayor que la del adenoma folicular. En cambio, el GPC3 no se expresa en el carcinoma anaplásico.

Formato:

Este producto se suministra como inmunoglobulina purificada y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos:

La detección de antígeno por inmunohistoquímica (IHQ) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnostic BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del Anticuerpo Primario:

Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para utilizarlos con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. La dilución adicional puede resultar en la pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio.

Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems, deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción, cuando se utilizan con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquiera de los métodos de detección distintos a los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse apropiadamente y verificarse de acuerdo con el sistema de detección utilizado.

Materiales Necesarios, pero no Suministrados:

Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com.

Almacenamiento y Manipulación:

Almacenar a 2-8 °C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8 °C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas de las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día. La presencia de precipitado o un olor inusual indica que el anticuerpo se deteriora y no se debe utilizar.

Control de Calidad:

Consulte las Normas de Calidad del CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauta aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org). 2011.

Solución de Problemas:

Contacto con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su Distribuidor local para informar coloración inusual.

Localización Celular:

Membrana celular.

Limitaciones del Procedimiento:

La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histológicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la incrustación o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad de la peroxidasa endógena o actividad pseudoperoxidasa en los eritrocitos y la biotina endógena pueden causar tinción no específica en función del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de la hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa de rábano (Omata et al, 1980). Una contra tinción y preparaciones inadecuadas pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de Presentación:

La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de sección de tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos únicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el uso exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador el determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.