CD68, Macrófago (KP1) Anticuerpo monoclonal de ratón

Inmunógeno: Fracción subcelular de los macrófagos alveolares humanos.
Clon: KP1
Especie: Ratón
Isotipo: IgG1, Kappa
Diluente Primario de Anticuerpos: K004

La concentración y especificaciones del lote disponibles a petición.

Catálogo # | Descripción

• Mob167: Anticuerpo concentrado para su uso con Diagnostic BioSystems PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de dos Pasos.
• PDM066: Anticuerpo listo para usar con BioSystems de Diagnóstico PolyVue™ Plus – Sistema de Detección de Dos Pasos.
• PDM066-10MM: Anticuerpo listo para usar con BioSystems de Diagnóstico Montage PolyVue Plus™ Sistema de detección automática y Montage™ Sistema 360.

Uso previsto
Para uso diagnóstico in vitro. Este producto está destinado para inmunohistoquímica cualitativa con secciones de tejido, fijado con formalina, embebidos en parafina, normal y neoplásico para ser visto por microscopía de luz. La interpretación clínica de los resultados de la tinción debe ir acompañada de los estudios histológicos con los controles adecuados. Las historias clínicas de los pacientes y otras pruebas diagnósticas pertinentes deben ser utilizadas por una persona(s) calificada al evaluar e interpretar los resultados.

Resumen y explicación
Este anticuerpo reconoce una glicoproteína de 110kDa, que se identifica como CD68. Es importante para la identificación de las células de estirpe monocito/macrógaga. Se muestra fuerte tinción citoplasmática granular en estas células y en la línea de células Kuffer y los macrófagos en la pulpa roja del bazo, la lamina propia del intestino, en los alvéolos pulmonares y en el seno de la médula. Reacciona con precursores mieloides y granulocitos de sangre periférica. También reconoce a las células de Langerhans y células dendríticas en la dermis, además de células del mesotelio. Reacciona con fibroblastos en la sinovia reumatoide, pero no en los fibroblastos de piel. La tinción con KP1 es citoplasmática, aunque también se observan tinciones en el golgi y en la membrana en algunos casos.

Formato
Este producto se suministra como una inmunoglobulina purificada y contiene azida sódica como conservante.

Principios de los Procedimientos
La detección de antígenos por inmunohistoquímica (IHC) es un proceso de dos etapas que implica en primer lugar, la unión de un anticuerpo primario contra el antígeno de interés, y segundo, la detección del anticuerpo unido por un cromógeno. El anticuerpo primario puede ser usado en IHQ, usando técnicas manuales o mediante el Sistema de tinción de Diagnósticos BioSystems Automated Montage 360™.

Dilución del anticuerpo primario
Los anticuerpos listos para usar de Diagnostic BioSystems, han sido optimizados para su uso en el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado y no requieren dilución adicional. Una dilución adicional puede resultar en pérdida de sensibilidad. El usuario debe validar cualquier cambio. Los anticuerpos concentrados de Diagnostic BioSystems, deben diluirse de acuerdo con el procedimiento de tinción, cuando se utilicen con el Sistema de Detección de Diagnostic BioSystems recomendado. El uso de cualquier de los sistemas de detección distintos a los sistemas y protocolos recomendados requiere validación por el usuario. Las diluciones de anticuerpos deben ajustarse y verificarse adecuadamente de acuerdo con el sistema de detección utilizado.

Materiales necesarios, pero no suministrados
Algunos de los reactivos y materiales necesarios para IHQ, no se proporcionan. Reactivos de pretratamiento, sistemas de detección, reactivos de control y otros reactivos auxiliares, están disponibles en Diagnostic BioSystems. Por favor diríjase a la página web de Diagnostic BioSystems, www.dbiosys.com

Almacenamiento y manipulación
Almacenar a 2-8°C. Este anticuerpo es adecuado para su uso hasta la fecha de caducidad cuando se almacena a 2-8°C. No utilice el producto después de la fecha de caducidad impresa en el vial. Si los reactivos se almacenan en condiciones distintas a las especificadas aquí, deben ser verificados por el usuario. Los reactivos diluidos deben utilizarse con prontitud. Las porciones no utilizadas de la preparación de anticuerpos deben desecharse después de un día. La presencia de precipitado o un olor unusual indica que el anticuerpo se está deteriorando y no se debe utilizar.

Los controles positivos y negativos se deben ejecutar simultáneamente con todas las muestras de pacientes. Si se observa una tinción inesperada y no se puede explicar por las variaciones en los procedimientos de laboratorio y se sospecha un problema con el anticuerpo, póngase en contacto con Soporte Técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2 o techsupport@dbiosys.com

Recogida y preparación de muestras
Los tejidos fijados en formalina al 10% son adecuados para uso antes de la inclusión de parafina. Consultar las referencias (Kiernan, 1981; Sheehan y Hrapchak, 1980) para más detalles sobre la preparación de muestras. Se recomienda al usuario validar el uso de los productos con sus muestras de tejido preparadas y manipuladas de acuerdo con sus prácticas de laboratorio.

Precauciones
Este anticuerpo contiene menos del 0.1% de azida sódica. Las concentraciones de menos de 0.1% no son materiales peligrosos reportables según US 29 CFR 1910.1200, la Comunicación de Riesgos y la Directiva 91/155/CE. El azida sódica (NaN3) usado como conservante es tóxico si se ingiere. El azida sódica puede reaccionar con las tuberías de plomo y cobre para formar azidas metálicas explosivas. Al desechar, enjuague con grandes volúmenes de agua para evitar la acumulación en las tuberías. (Centro para el Control de Enfermedades, 1976, Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional, 1976). Los especímenes, y después de la fijación y todos los materiales expuestos a ellos, deben ser manipulados como si fueran capaces de transmitir infecciones y desecharse con las precauciones adecuadas. Nunca pipetear reactivos con la boca y evitar el contacto con la piel y las membranas mucosas con los reactivos y muestras. Si los reactivos o muestras entran en contacto con zonas sensibles, lavar con abundantes colipos de agua. La contaminación microbiana de los reactivos puede resultar en un aumento de la tinción no específica. Los tiempos de incubación y temperaturas distintas de los especificados puede dar resultados erróneos. El usuario debe validar cualquier cambio. El MSDS está disponible bajo petición.

El tratamiento de los tejidos antes de la tinción
Colocar los portaobjetos en la solución de recuperación de antígeno recomendado usando el Sistema de recuperación de antígeno de Diagnóstic BioSystems, Montage Opus™. Permitir enfriar las laminillas durante 20 minutos antes de la tinción.

Procedimiento de tinción
Consulte la siguiente tabla para obtener las condiciones recomendadas específicamente para este anticuerpo. Consulte el sistema de detección de Diagnóstico BioSystems PolyVue™ Plus de dos pasos, o Sistema de Detección de Montage PolyVue Plus™ Auto para obtener las instrucciones sobre los protocolos de tinción específicos u otros requisitos.

Parámetro | Recomendaciones Diagnostic BioSystems

• Control positivo: Amígdala
• Dilución del concentrado: 1:50 – 1:100
• El pretratamiento: EDTA Buffer pH 8.0
• Tiempo de incubación y temperatura: 30 min @ RT
• Sistema de Detección: Sistema de Detección de dos pasos PolyVue™ Plus o Sistema de detección automática Montage PolyVue Plus™ para usar con el sistema Montage 360
• Tipo de tejido: FFPE

Control de calidad
Consulte las Normas de Calidad de CLSI para el Diseño e Implementación de ensayos de inmunohistoquímica; Pauita aprobada Segunda edición (E / LA28-A2) CLSI Wayne, PA EE.UU. (www.clsi.org), 2011.

Solución de problemas
Contacte con el soporte técnico de Diagnostic BioSystems al (925) 484-3350, extensión 2, techsupport@dbiosys.com o con su Distribuidor local para informar coloración inusual.

Localización celular
Citoplasmática

Limitaciones del procedimiento
La inmunohistoquímica es una técnica compleja que implica ambos métodos de detección histoquímicos e inmunológicos. El procesamiento de tejidos y la manipulación antes de la inmuno-tinción también puede causar resultados inconsistentes. Las variaciones en la fijación y la inclusión o de la naturaleza inherente del tejido pueden causar variaciones en los resultados (Nadji y Morales, 1983). La actividad endógena de peroxidasas o actividad pseudoperoxidasa en eritrocitos endógenos puede causar manchas no específicas dependiendo del sistema de detección utilizado. Los tejidos que contienen superficie de hepatitis B antígeno (HBsAg) pueden dar un falso positivo con los sistemas de peroxidasa basado en placenta (Omata et al, 1980). Una contramarcha y el montaje inadecuados pueden comprometer la interpretación de los resultados.

Características de presentación
La dilución óptima del anticuerpo y los protocolos para una aplicación específica pueden variar. Estos incluyen, pero no se limitan a: la fijación, el método de recuperación de calor, los tiempos de incubación, y el espesor de la sección del tejido y el kit de detección utilizado. Debido a la sensibilidad superior de estos reactivos clínicos, los tiempos y los títulos de listados de incubación recomendados no son aplicables a otros sistemas de detección, ya que los resultados pueden variar. Las recomendaciones y los protocolos de hoja de datos se basan en el exclusivo de los productos Diagnostic BioSystems. En última instancia, es responsabilidad del investigador de determinar las condiciones óptimas. Estos productos son herramientas que pueden utilizarse para la interpretación de los resultados morfológicos en conjunción con otras pruebas de diagnóstico y los datos clínicos pertinentes por un patólogo cualificado.

Referencias

1. Micklem et al. Br J Haematol 73: 6, 1989.
2. Miettinen et al. J Clin Pathol 42: 414, 1989.
3. Ruco et al. Am J Clin Pathol 92: 273, 1989.
4. Warnke et al. Am J Pathol 135: 1089, 1989.

Formatos Disponibles

• Mob167: Anticuerpo concentrado para uso con el sistema de detección automatizado Biosystems PolyVue™ Plus.
• PDM066: Anticuerpo listo para usar en combinación con el sistema de detección de dos pasos Biosystems PolyVue™ Plus.
• PDM066-10MM: Anticuerpo listo para usar para anticuerpos para su uso con Diagnostic BioSystems Montage PolyVue Plus™ Sistema de Detección Automática y Montage™ Sistema 360.

Este anticuerpo no contiene más de 0.1% de azida sódica como conservante y debe almacenarse entre 2-8 °C. Evite la exposición a la luz directa y manipule con las precauciones adecuadas para evitar contaminación. En caso de problemas técnicos, consulte al soporte de Diagnostic BioSystems para asistencia.